饲料添加剂 L-色氨酸 - L-色氨酸含量的测定

GB/T 25735-2010 饲料添加剂 L-色氨酸

范围
本标准规定了饲料添加剂 L-色氨酸产品的要求、试验方法、检验规则及标签、包装、运输和贮存。
本标准适用于以微生物发酵生产的饲料添加剂 L-色氨酸。
分子式: C₁₁H₁₂N₂O₂
相对分子质量: 204.23(按2007年相对原子质量)
结构式:


要求
性状
白色至微黄色结晶或结晶性粉末，无嗅或略有气味，略溶于水，溶于热乙醇和氢氧化钠溶液。
鉴别
氨基酸定性鉴别
试样的水溶液与茚三酮溶液反应，溶液呈红紫色。
色氨酸定性鉴别
按 GB/T 18246 测定，要求试样溶液色氨酸色谱峰保留时间与标准溶液相同，且测定含量在98%±2%~98%±3%之内。
比旋光度法
试样的水溶液经旋光仪测定，其测定值在-29.0°~-32.8°之间。
技术指标
技术指标应符合表1规定。


试验方法
除特殊说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水符合 GB/T 6682 中三级用水规定，试剂和溶液的制备应符合 GB/T 601、GB/T 602 和GB/T 603 的规定。

试剂和溶液
茚三酮溶液: 1g/L水溶液。
色氨酸标准品: 色氨酸含量注99.0%。
色氨酸标准溶液(100nmol/mL): 称取色氨酸标准品0.0510g(至0.0001g)，加水溶解(加1滴10%氢氧化钠溶液)并定容至50mL，取该溶液1mL，用水定容至50mL。
甲酸。
冰乙酸。
高氯酸标准溶液: c(HClO₄)=0.1mol/L。
α-萘酚苯基甲醇指示剂: 2g/L冰乙酸溶液。

仪器和设备
除实验室常用设备以外，还需要以下仪器和设备:
氨基酸分析仪。
电位滴定仪。
电极: 饱和甘汞电极及玻璃电极。
酸度计。

L-色氨酸含量的测定
测定方法
称取0.25g(至0.0001g)干燥至恒重的试样于干燥的100mL烧杯或锥形瓶中，加入3mL甲酸，待试样*溶解后加入50mL冰乙酸，将电极插入溶液中，调节搅拌速度至溶液充分涡旋，按仪器说明书调整仪器参数，用高氯酸标准溶液进行电位滴定，以电位值突变作为滴定终点。如选择指示剂法，加入10滴α-萘酚苯基甲醇指示剂，用高氯酸标准溶液进行滴定，试样液由橙黄色变为黄绿色即为滴定终点。
同时做空白试验。

结果计算
L-色氨酸(C₁₁H₁₂N₂O₂)含量X 以质量分数(%)表示，按式(1)计算:

式中:
V₁一一试样消耗高氯酸标准溶液体积，单位为毫升(mL)；
V₀一一空白试验消耗高氯酸标准溶液体积，单位为毫升(mL)；
c  一一高氯酸标准溶液浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；
m 一一试样质量，单位为克(g)；
204.23一一L-色氨酸的摩尔质量，单位为克每摩尔(g/mol)。
平行测定结果用算术平均值表示，保留三位有效数字。
重复性
同一分析者对同一试样同时进行两次平行测定的结果相差应不大于0.5%。


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