食品加工用氨基酸 - 含量的测定（电位滴定法）

T/CBFIA 04001-2019 食品加工用氨基酸

范围
本标准规定了食品加工用氨基酸的氨基酸命名、分子式、相对分子质量、结构式技术要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输、贮存。
本标准适用于以生物质为原料，经生物发酵、酶法转化或水解提取精制而成的食品加工用氨基酸。

氨基酸命名、分子式、相对分子质量、结构式
本标准中，各品种氨基酸的命名、分子式、相对分子质量和结构式应符合表1中的规定。








技术要求
感官要求
白色或微黄色颗粒状结品或粉末状结晶。
理化要求
L-异亮氨酸
应符合表2要求。


L-缬氨酸
应符合表3要求。


L-亮氨酸
应符合表4要求。


L-苯丙氨酸
应符合表5要求。


L-苏氨酸
应符合表6要求。


L-谷氨酸
应符合表7要求。


L-色氨酸
应符合表8要求。


L-酪氨酸
应符合表9要求。


L-脯氨酸
应符合表10要求。


L-精氨酸
应符合表11要求。


L-丝氨酸
应符合表12要求。


L-醋酸赖氨酸
应符合表13要求。


L-盐酸精氨酸
应符合表14要求。


L-盐酸半胱氨酸一水物
应符合表15要求。


L-盐酸鸟氨酸
应符合表16要求。


L-甲硫氨酸
应符合表17要求。


L-组氨酸。
应符合表18要求。


L-丙氨酸
应符合表19要求。


L-门冬酰胺一水物
应符合表20要求。


L-谷氨酰胺
应符合表21要求。


L-盐酸组氨酸一水物
应符合表22要求。


L-羟基脯氨酸
应符合表23要求。


L-4-羟基异亮氨酸
应符合表24要求。


L-门冬氨酸
应符合表25要求。


L-胱氨酸
应符合表26要求。


L-盐酸赖氨酸
应符合表27要求。


L-茶氨酸
应符合表28要求。


?；撬?br />应符合表29要求。


卫生要求
应符合表30要求。


试验方法
含量
按照附录A规定的方法测定。

附录A  (规范性附录)
含量的测定

含量测定
L-异亮氨酸
取本品约0.1g，精密称定，加无水甲酸1mL溶解后，加冰醋酸25mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于13.12mg的C₆H₁₃NO₂。
L-苯丙氨酸
取本品约0.13g，精密称定，加无水甲酸3mL溶解后，加冰醋酸50mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于16.52mg的C₉H₁₁NO₂。
L-苏氨酸
取本品约0.1g，精密称定，加无水甲酸3mL使溶解，再加冰醋酸50mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于11.91mg的C₄H₉NO₃。
L-色氨酸
取本品约0.15g，精密称定，加无水甲酸3mL溶解后，加冰醋酸50mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于20.42mg的C₁₁H₁₂N₂O₂。
L-酪氨酸
取本品约0.15g，精密称定，加无水甲酸6mL溶解后，加冰醋酸50mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当18.12mg 的C₉H₁₁NO₃。
L-脯氨酸
取本品约0.1g，精密称定，加冰醋酸50mL使溶解，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于11.51mg的C₅H₉NO₂。
L-精氨酸
取本品约80mg，精密称定，加无水甲酸3mL使溶解后，加冰醋酸50mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于8.710mg的C₆H₁₄N₄O₂。
L-丝氨酸
取本品约0.1g，精密称定，加无水甲酸1mL溶解后，加冰醋酸25mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于10.51mg的C₃H₇NO₃。
L-醋酸赖氨酸
取本品约0.1g，精密称定，加无水甲酸3mL溶解后，加冰醋酸30mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于10.31mg的C₆H₁₄N₂O₂•C₂H₄O₂。
L-盐酸精氨酸
取本品约0.1g，精密称定，加无水甲酸3mL使溶解，加冰醋酸50mL，与CH₃COO)₂Hg试液(取CH₃COO)₂Hg 5g，研细，加温热的冰醋酸使溶解成100mL，即得。本液应置棕色瓶内，密闭保存)6mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于10.53mg的C₆H₁₄N₄O₂•HCl。
L-盐酸鸟氨酸
取本品约0.10g，精密称定，加无水甲酸3mL溶解后，加CH₃COO)₂Hg试液(取CH₃COO)₂Hg 5g，研细，加温热的冰醋酸使溶解成100mL，即得。本液应置棕色瓶内，密闭保存)5mL，加冰醋酸25mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于8.431mg的C₅H₁₂N₂O₂•HCl 。
L-甲硫氨酸
取本品约0.13g，精密称定，加无水甲酸3mL使溶解后，加冰醋酸50mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于14.92mg的C₅H₁₁NO₂S。
L-组氨酸
取本品约0.15g，精密称定，加无水甲酸2mL使溶解后，加冰醋酸50mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于15.52mg的C₆H₉N₃O₂。
L-丙氨酸
取本品约80mg，精密称定，加无水甲酸2mL使溶解后，加冰醋酸50mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于8.909mg的C₃H₇NO₂。
L-谷氨酰胺
取本品约0.12g，精密称定，加无水甲酸3mL溶解后，加冰醋酸50mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于14.61mg的C₅H₁₀N₂O₃。
L-羟基脯氨酸
取本品约130mg，精密称定，加无水甲酸3mL溶解后，加冰醋酸50mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于13.113mg的C₅H₉NO₃。
L-门冬氨酸
取本品约0.1g，精密称定，加无水甲酸5mL溶解后，加冰醋酸30mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于13.31mg的C₄H₇NO₄。
L-盐酸赖氨酸
取本品约90mg，精密称定，加无水甲酸3mL使溶解，加冰醋酸50mL与CH₃COO)₂Hg试液(取CH₃COO)₂Hg 5g，研细，加温热的冰醋酸使溶解成100mL，即得。本液应置棕色瓶内，密闭保存)10mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于9.133mg的C₆H₁₄N₂O₂•HCl。
L-茶氨酸
取样品约0.14g，精密称定，置于150mL烧杯中，加入3mL无水甲酸，溶解后，再加50mL冰醋酸。加结晶紫指示液(取结晶紫0.5g，加冰醋酸100mL使溶解，即得)1滴，将烧杯置电磁搅拌端上，浸入电极，搅拌，用0.1mol/L高氯酸标准液滴定，记录电位。用坐标纸以电位(E )为纵坐标，以滴定液体积(V )为横坐标，绘制E-V 曲线，以此曲线的陡然上升或下降部分的中心为滴定终点。同时进行空白试验。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于L-茶氨酸17.12mg。
?；撬?br />取本品约0.2g，精密称定，加水50mL溶解，精密加入中性甲醛溶液[取甲醛溶液，滴加酚酞指示剂(取酚酞1g，加乙醇100mL使溶解，即得)5滴，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液调节至溶液显微粉红色]5mL，照电位滴定法，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1mL氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于12.52mg的C₂H₇NO₃S。

电位滴定法
电位滴定法: 将盛有供试品溶液的烧杯置电磁搅拌端上，浸入电极，搅拌，并自滴定管中分次滴加滴定液；开始时可每次加入较多的量， 搅拌，记录电位；至近终点前，则应每次加入少量，搅拌，记录电位；至突跃点已过，仍应继续滴加几次滴定液，并记录电位。
滴定终点的确定分为作图法和计算法两种。作图法是以指示电极的电位(E )为纵坐标，以滴定液体积(V )为横坐标，绘制滴定曲线，以滴定曲线的陡然上升或下降部分的中点或曲线的拐点为滴定终点。根据实验得到的E 值与相应的V 值，依次计算first derivative ?E /?V (相邻两次的电位差与相应滴定液体积差之比)和second derivative ?²E /?V²(相邻?E /?V 值间的差与相应滴定液体积差之比)值，将测定值(E，V )和计算值列表。再将计算值ð?E /?V 或?²E /?V²作为纵坐标，以相应的滴定液体积(V )为横坐标作图，first derivative ?E /?V 的极值和second derivative ?²E /?V²等于零( 曲线过零)时对应的体积即为滴定终点。前者称为一阶导数法，终点时的滴定液体积也可由计算求得，即?E /?V 达极值时前、后两个滴定液体积读数的平均值；后者称为二阶一导数法，终点时的滴定液体和、也可采用曲线过零前、后两点坐标的线性内插法计算，计算公式见式(A.2):

式中:
V₀一一终点时的滴定液体积；
a  一一曲线过零前的second derivative绝对值；
b  一一曲线过零后的second derivative绝对值；
V  一一a 点对应的滴定液体积；
?V一一由a 点至b 点所滴加的滴定液体积。
由于二阶导数计算法最准确，所以最为常用。
采用自动电位滴定仪可方便地在得滴定数据或滴定曲线。
如系供终点时指示剂色调的选择或核对，可在滴定前加入指示剂，观察终点前至终点后的颜色变化，以确定该品种在滴定终点时的指示剂颜色。


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